Marco Teórico


Las letrinas públicas romanas se disponían uniformemente en tres paredes de una gran habitación que podía albergar hasta 15 personas, sentadas una al lado de la otra. Estudios arqueológicos han demostrado que ya en la antigua Roma existía la práctica de escribir en las paredes
La publicación de la New York University Press, "Los baños públicos y la política de uso compartido" reúne doce ensayos de urbanistas, historiadores y analistas culturales que expresan sus puntos de vista. Son pocos los análisis que cuentan mejor la evolución de las costumbres como la de los baños públicos.
Uno de los graves problemas de la sociedad es que no hay un interés significativo por el tema de los baños móviles, su higiene y las enfermedades que puede contraer haciendo uso de estos baños públicos móviles, por parte de microorganismos que se encuentran en estos baños y que pueden presentar riesgos para la salud del usuario. {6}

Baños Públicos Móviles De Medellín
Para el alquiler y operación de baños móviles para la utilización gratuita de la comunidad de Medellín se licita a empresas privadas por medio de subasta inversa. En el documento de acceso público más actual se encuentran datos como la estadística histórica de usos (Ver anexo 3) Que señala que el 65.1 % de los usuarios del servicio de baños gratuitos para la comunidad en el Municipio de Medellín, específicamente en el centro de la ciudad corresponde al sexo masculino. También muestra los sitios donde se presta el servicio (Ver anexo 4).
ENFERMEDADES CAUSADAS POR MICROORGANISMOS
Generalmente los microorganismos patógenos viven dentro de organismos hospedadores que aparentemente son inofensivos. Un microorganismo patógeno primero se reproduce y dispersa su progenie a nuevos hospedadores para que tenga éxito según el criterio evolutivo.  
Los efectos que producen los microbios son producidos por mecanismos comunes como el virus, que penetran en tipos particulares de células y a menudo las destruyen.
Algunas enfermedades son el resultado de la interacción de un cuerpo con el organismo patógeno. Por ejemplo, en la neumonía, causada por el streptococcus  pneumoniae  la infección causa una sobreproducción de líquidos y células que interfiere con el proceso respiratorio, entre otras enfermedades.
En los baños de uso público se puede hallar el riesgo de contraer enfermedades producidas por bacterias sumamente peligrosas como el estafilococo, que causa irritaciones cutáneas, y trae el riesgo de infectarse con microbios peores que en los casos menos graves produce diarreas.
Sólo una pequeña parte de los miles de especies de bacterias causan enfermedades humanas conocidas. Las infecciones bacterianas se evitan destruyendo las bacterias con calor, como se hace en las técnicas de esterilización y pasteurización. Cuando se producen, las enfermedades bacterianas se tratan con antibióticos. Pero el abuso de estos compuestos en los últimos años ha favorecido el desarrollo de cepas de bacterias resistentes a su acción, como Mycobacterium tuberculosis, que causa la tuberculosis.
Las micosis varían considerablemente en sus manifestaciones, pero tienden a ser enfermedades subagudas o crónicas de curso indolente y recurrente. Los hongos rara vez causan infecciones agudas como las producidas por muchos virus y bacterias. {12}
AMPLIAR LA INFORMACIÓN
Cultivo de microorganismos
Clasificación de los medios de cultivo
1.  Según su estado físico
Líquidos
Usualmente se denominan caldos ya que contienen los nutrientes disueltos en agua. Permiten obtener suspensiones con un elevado número de microorganismos. Ej. Caldo nutritivo. {13}
Sólidos
Se pueden preparar a partir de medios líquidos a los cuales se les añaden agentes solidificantes como agar, gelatina o sílica gel. Se utilizan con frecuencia en el aislamiento y mantenimiento de los microorganismos en el laboratorio. Ej. Agar nutritivo. {13}
CONDICIONES AMBIENTALES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS
1. Temperatura
Cada microorganismo tiene una temperatura óptima en la cual su crecimiento es más rápido; una temperatura mínima por debajo de la cual no crece y una temperatura máxima por encima de la cual el crecimiento no es posible, estas tres temperaturas se denominan temperaturas cardinales y son características de cada microorganismo.   El rango de temperaturas entre las que un microorganismo puede crecer es variable, hay microorganismos con un rango estrecho llamados ESTENOTERMALES y se encuentran en hábitat de temperatura relativamente constante. Los microorganismos de rangos más amplios se encuentran en medios ambientales donde la temperatura varía considerablemente y éstos son llamados EURITERMALES. {14}
De acuerdo con el rango de temperatura a la que  crecen, los microorganismos se dividen en:
1.1  Psicrófilos: Microorganismos capaces de crecer a bajas temperaturas. Existen varias definiciones de psicrófilos, en un inicio se definía como Psicrófilo a cualquier microorganismo que podía crecer a 0 ºC. Sin embargo, parecen haber dos grupos diferentes que pueden crecer a esa temperatura. El primer grupo está constituido por los psicró-filos estrictos o aquellos microorganismos que pueden crecer a 0 ºC pero cuya temperatura óptima es de 15 ºC. El otro grupo los constituyen aquellos microorganismos que pueden proliferar a 0 ºC pero que tienen temperaturas óptimas más elevadas 20 - 30 ºC llamados psicrófilos facultativos.  Ej. Pseudomonas.
1.2  Mesófilos: Microorganismos cuya temperatura óptima de crecimiento se encuentra dentro de un rango de 25 – 40 º C. Dentro de este grupo se encuentran la mayoría de los microorganismos contaminantes de los productos farmacéuticos, alimentos y cosméticos y los microorganismos patógenos para el hombre. Ej. Neisseria gonorrhoeae. {14}
PH: La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios más o menos ácidos. No se debe olvidar que la presencia de ácidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metabólicos normales. {15}
LUZ AMBIENTAL: La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso de los microorganismos fotosintéticos. {15}
ESTERILIDAD DEL MEDIO: Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante). {16}
CULTIVO DE OTROS MICROORGANISMOS ESPECÍFICOS
HONGOS (ORGANISMOS CELULARES HETERÓTROFOS CON PARED CELULAR)
Los hongos se pueden estudiar usando los mismos métodos generales de cultivo de las bacterias. Casi todos crecen aeróbicamente en los medios de cultivo usuales de bacteriología, a  temperaturas entre 20 y 30° C; como crecen más lento que las bacterias, cuando se quieren aislar de un inóculo que posea ambos tipos de microorganismos, es necesario ajustar las condiciones de  manera de inhibir el crecimiento de las bacterias y favorecer el de los hongos, esto puede hacerse de varias maneras:  
a) Acidificando el medio (pH 5,6).
b) Incorporando al medio una concentración de azúcar relativamente alta (4%).
c) Añadiéndole al medio un agente antibacteriano.
El medio más utilizado para el cultivo de los hongos es el de SABOURAUD, que tiene un contenido alto de azúcar y un pH ligeramente ácido. Los hongos patógenos a menudo son más exigentes para su cultivo y requieren medios enriquecidos. {17}
MICOPLASMAS (BACTERIAS SIN PARED CELULAR)
Los micoplasmas tienen requerimientos nutricionales especiales. Los medios de cultivo se deben enriquecer con suero animal (caballo o conejo) o líquido ascítico humano. Estos líquidos aportan los  ácidos grasos  no  saturados y los esteroles que se requieren para la síntesis de la membrana citoplasmática.
El medio de cultivo más utilizado para los micoplasmas contiene: caldo cerebro-corazón suplementado con 0,5% de glucosa, 0,2% de arginina, 10%  de extracto de levaduras, 20% de suero de caballo, rojo fenol, penicilina o acetato de talio (250 µg/ml) y agar 0,6-0,8%.
Muestreo Con Aplicadores de Algodón Estériles.
Para éste tipo de muestreo, se utilizan aplicadores de algodón estériles humedecidos con una solución de dilución o neutralizante en este caso agua peptonada, en una superficie de 20 cm2 marcados con una plantilla estéril. Se tomarán por el mango los hisopados sin tocar el algodón. Se humedece y se introduce en el tubo con la solución señalada anteriormente, para esto se debe de exponer el tubo para evitar el contacto del guante con el exterior. Presiona el aplicador contra la pared interior del tubo para eliminar el exceso de líquido. La superficie de muestreo se frotará diez veces de arriba hacia abajo, con una fuerte presión. Cada hisopo se recogerá en el tubo estéril que contiene los 4 ml de solución de dilución, para esto se colocara el hisopado en el tubo y se corta asépticamente el mango. Las muestras recogidas con los hisopos se mantendrán entre 1 – 4 ºC hasta su procesamiento. Serán llevadas a los laboratorios en  24 horas. Y se realizarán los recuentos de bacterias  y se expresarán en número de microorganismos por cm2.
Materiales
- Plantilla de aluminio de 25 cm2  estéril
- Hisopados estériles de algodón no absorbente de 0,5 cm de diámetro por 2 cm de largo sobre un aplicador de madera de 12 a 15 cm de largo
- Hisopos estériles de alginato de calcio o rayón también pueden ser usadas
-Placas Petri
- Pipetas estériles de 1 y 5 mL
Equipos
- Incubadora regulada a 35°C ± 1°C
Reactivos y medios de cultivo
- Solución de hexametafosfato de sodio al 1%, sodio glicerofosfato o citrato de sodio cuando se utilicen hisopos de alginato de calcio las cuales sus fibras son  solubles en estas soluciones acuosas.
- Medio de transporte si se requiere
- Frasco pequeño  con tapa de rosca y con 5 perlas de vidrio de 3 mm de diámetro con 10 mL de Diluyente de máxima recuperación (MRD) o solución Ringer al cuarto de concentración estéril.
- Si se utilizan hisopos de alginato de calcio, se requieren frascos  de 7 a 10 cm de largo con 4,5 mL del buffer de enjuague.
- Agar Plate Count u otro medio de cultivo apropiado  según los microorganismos de interés
Toma de muestras.
Existen dos formas de tomar las muestras:
•  La cualitativa: con un escobillón estéril, humedecido en caldo de cultivo estéril, se toma la muestra rotándolo sobre sí mismo y recorriendo la superficie a tomar y se pasa a un medio de cultivo directamente o se puede pasar a un caldo de cultivo para incubarlo y luego pasarlo al medio de cultivo.
•  La cuantitativa: se toma con un escobillón estéril con ayuda de una plantilla de, por ejemplo: 5,10,20 cm2 para luego realizar siembra en placa profunda que permite realizar un recuento y reportarlo por  UFC/ml. La forma cuantitativa se realiza por métodos de contacto y existen las siguientes opciones: 1) por medio de la ayuda de una plantilla (5,10,20 cm2) adquirida comercialmente o fabricada por el usuario en un material que se pueda esterilizar, y depositar el escobillón en un tubo que 74 contenga 10 ml de caldo de cultivo o agua peptonada; esto con el fin de poder realizar diluciones y sembrar en profundidad. {18}
TOMA DE MUESTRAS CON APLICADORES DE ALGODÓN ESTÉRILES.
- Abrir asépticamente el contenedor estéril con el hisopado, tomarlo por la parte superior del aplicador de madera, cuidando de no tocar ninguna parte que será insertada en el frasco.
- Abrir el frasco con el diluyente en forma aséptica.
- Sumergir un hisopo de algodón en una alícuota de 10 mL de diluyente (MRD o líquido de Ringer  al cuarto de  concentración) contenido en un frasco pequeño o tubo de tapa rosca, que contiene de  5 perlas de vidrio pequeñas (3 mm de diámetro).
- Si se  utilizan hisopos de alginato de calcio sumergirlo en una alícuota  de 4,5 mL de la solución buffer de enjuague.
- Si se han utilizado higienizantes para limpiar la superficie, el diluyente debe contener  algún neutralizante de los mencionados en la NOTA en el  punto 6.
- Escurrir el exceso de líquido de la torunda apretándola contra la pared del frasco o tubo y mantener firmemente la plantilla estéril  sobre la superficie a muestrear
-  Frotar con la cabeza del hisopo en un ángulo de 30°, toda la zona de muestreo (25 cm2) girándola  en tres direcciones  para aumentar al máximo su capacidad de recoger microorganismos.
- Romper la parte superior, y el extremo algodonoso dejarlo caer en los 10 mL o 4,5 mL de diluyente contenido en el frasco, envase o tubo.
- Tomar un segundo hisopo y repetir la frotación del área como antes.
Siembra del Cultivo:
- Agitar enérgicamente el frasco o tubo que contiene las torundas y las perlas de vidrio hasta que las torundas  se deshilachen dando fibras de algodón,  haciendo 50 ciclos completos de 15 cm en 10 segundos, golpeando la palma de la otra mano al término de cada ciclo. Grupos de frascos  o tubos pueden ser agitados al mismo tiempo.


- Utilizando el método de recuento en placa PRT-712.02-023 realice la siembra y cuente los microorganismos en suspensión. Para ello siembre 1 y 0,1 mL  o diluciones si fuera necesario  de la muestra agitada previamente  con el diluyente.
- Incubar 48 horas a 35°C ± 1°C.
- Cuando otro tipo de microorganismo es buscado añada el respectivo agar selectivo/ diferencial e incube conforme a  las condiciones requeridas.
Interpretación de  resultados:
- Conforme a la U.S. Public  Health Service  se recomienda  que la limpieza adecuada y la sanitización  de equipamientos para servicios de alimentos no debe ser mayor a 100 colonias por utensilio o área de superficie del equipamiento muestreado.
-  La interpretación de resultados en áreas que no pueden ser medidas  deberán estar basadas en los datos históricos obtenidos cuando las áreas han sido sometidas a limpieza y sanitización. Generalmente los niveles de microorganismos no deberían exceder más que unas pocas colonias y en muchos casos el tipo de microorganismos puede ser más significativo que sólo el número.  
Cálculo:
Realizar el cálculo según la siguiente fórmula:
10 x N / 25 microorganismos por cm2
- Para las superficies irregulares en donde no se puede calcular un área, los resultados se pueden registrar en base  a todo el sitio de muestreo en lugar de un área de medida.
Informe de resultados:
- Informar los resultados como N° de microorganismos por cm2.
N° DE MICROORGANISMOS
INTERPRETACION
< 1 colonia / cm2  ----------------   Excelente
De 2 a 10 colonias / cm2--------   Bueno
11 ó más colonias / cm2 --------   Limpiar la superficie inmediatamente.
NIVEL DE MICROORGANISMOS
NIVEL                                                         N° ufc/100 cm 2
Muy bajo riesgo                                          < 10
Riesgo moderado                                       >10 < 100
Alto nivel de riego                                       > 100 < 1000
Muy alto nivel de riego                               >1000
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IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS Y REFERENCIACIÓN DE ESPECIES.  NO ENTIENDO ESTA PARTE, VEO QUE EL MARCO TEORICO ESTA EN DESORDEN
2) el método rodac; y 3) el método de petrifi lm (30,31,32).
Dada la gran importancia de los microorganismos para el ser humano, se han desarrollado una serie de metodologías para poder diferenciar un microorganismo de otro. Las cuales se ha basado tradicionalmente en la observación  de los síntomas que presentan los hospedadores, en la observación macro o microscópica del microorganismo o bien de las estructuras reproductivas de los microorganismos, del desarrollo del patógeno en un medio de cultivo específicoo, de la coloración producida al aplicar algunos colorantes sobre el tejido infectado, o bien sobre el patógeno  y la reacción  de un anticuerpo a la presencia de un patógeno.
La identificación  de un microorganismo (patógeno) basada en los sintomatología presenta  varias desventajas  como por ejemplo, los síntomas son muy variados y numerosos; dependen del hospedero del patógeno, e incluso de los factores del medio ambiente en el que se desarrolla el proceso patológico. Debido  a lo anterior  la identificación de patógenos basada solo en los síntomas  puede dar origen a errores graves en el diagnóstico de una enfermedad dado que dos diferentes patógenos pueden producir los mismos síntomas  en el mismo hospedero.

La detección de un microorganismo basada en la observación macro o microscópica  es más eficiente que la identificación basada solo en los síntomas. La observación a nivel macro o microscópico es un procedimiento  simple, es una detección directa de patógenos y puede diferenciar organismos distintos morfológicamente. Presenta las siguientes desventajas: 1.- Es un procedimiento lento, 2.- Laborioso y 3.-Tedioso dado que se tiene que  aislar el microorganismo (lo cual no en todos los casos es posible) y poner a crecerlo en un medio de cultivo hasta que se alcance  un tamaño o una etapa de crecimiento adecuada para su identificación. {19}